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TNFR1:癌癥雙重作用分子,或可作為新型冠狀病毒(COVID-19)治療靶點

日期:2021-02-04 15:18:42

2021年1月7日,發表在Cancer Research雜志上的一項研究表明TNFR1介導的細胞凋亡和壞死與白血病相關 [1]。作為一個熱門的生物靶點,TNFR1具有雙重作用,大量研究證實TNFR1的表達,能促進或抑制腫瘤細胞的凋亡,同時參與自身免疫性疾病。更引人關注的是,有研究數據顯示,TNFR1抑制劑有望為成為治療COVID-19候選方案。但TNFR1復雜的生物學功能,使得TNFR1靶向藥物的研發面臨重重挑戰。去年2020年9月,全球頂級研究學者Marc Feldmann和Michael Shepard發起了一個項目,研發TNFR1特效抑制劑,該抑制劑可阻斷TNFR1,用于急性炎癥和多種癌癥治療。那么TNFR1是什么?它介導的信號通路是怎樣的?TNFR1為何與COVID-19有關?靶向TNFR1藥物研發的潛在價值如何?


1. TNFR1結構和功能

TNFR1屬于腫瘤壞死因子(TNF)受體超家族成員之一,又稱TNFRSF1A,CD120a或p55,是分子量為55 ku的I型跨膜糖蛋白 [2]。TNFR1包含胞外區、跨膜區和胞內區三個部分。胞外結構域含182個氨基酸,由4個富含半胱氨酸的結構域(CRD1-CRD2-CRD3-CRD4)組成。跨膜區位于細胞外結構域和細胞內結構域之間,長約22個氨基酸(殘基183-205個)。胞內結構域長約223個氨基酸。其中,在胞外結構域有3個潛在的N-糖基化位點,其功能主要是與三聚體形式的TNF結合。N末端殘基是亮氨酸。C末端含有80個保守氨基酸序列所構成的死亡結構域(Death domain,DD),是轉導細胞死亡信號所必需的,且TNFR1的很多功能都與此結構域有關(圖1[3, 4]

TNFR1的蛋白質結構

圖1. TNFR1的蛋白質結構

*本圖來源于ResearchGate 出版物[4]

TNFR1廣泛分布于正常細胞膜表面,也存在于多種腫瘤細胞表面 [5]。TNFR1主要介導凋亡信號,引起細胞凋亡,在抗腫瘤和抗病毒感染中發揮重要作用,同時也參與自身免疫性疾病,是誘導類風濕關節炎 [6]和系統性紅斑性狼瘡(SLE)關鍵因子 [7]。由于TNFR1參與到復雜的生物學過程,使得TNFR1精確的功能意義尚不清楚。


2. TNFR1的配體TNF

TNF是三個相同的單體亞單位組成的致密三聚體 [8]。TNF包含TNF-α和TNF-β兩種,屬于Ⅱ型膜蛋白。巨噬細胞分泌出來的TNF,即TNF-α。T淋巴細胞分泌的淋巴毒素,即TNF-β [9]。TNF總活性中,TNF-α的占比為70%~95%,所以,平時所指的TNF基本為TNF-α [10]

TNFα在體內又以兩種形式存在,分別是跨膜型TNF-α(tmTNF-α)和可溶型TNF-α(sTNF-α)。tmTNF-α為sTNF-α的前體形式,通過TNF轉化酶(TACE,又稱ADAM17)的剪切,分泌到細胞外,形成可溶性sTNF-α(圖2[11]

tmTNF-α轉化為sTNF-α過程

圖2. tmTNF-α轉化為sTNF-α過程

*本圖來源于Ochsner Journal 出版物[11]

兩型TNFα與受體(TNFR1或TNFR2)相互作用而誘導生物效應,但因TNFR2缺乏死亡結構域,TNFR1便成為介導TNF-α活動的主要受體 [12, 13, 14]。TNFR1與TNF-α的胞外段結合后而引起胞內段構像的改變,使TNFR1激活 [15]


3. TNFR1介導的信號通路

3.1 TNFR1-sTNF-α信號通路

TNFR1與sTNF-α結合,啟動的下游信號通路已經非常明確。TNFR1作為sTNF-α的主要受體,其胞內段含有DD(death domain,死亡結構域)。在無sTNF-α刺激時,TNFR1的DD被死亡結構域的沉默子蛋白(SODD)占據,阻斷TNFR相關死亡結構域蛋白(TRADD)與TNFR1的銜接,抑制TNFR1信號通路 [16]。當sTNF-α刺激后,sTNF-α與TNFR1結合,SODD從TNFR1的DD結構域脫落,TNFR1通過其暴露的DD結構域募集TRADD,TNFR1信號通路激活(圖3[17]

當TNFR1/sTNF-α激活后,TRADD可以募集受體相關蛋白-1(RIP1)以及受體相關因子2(TRAF2),在胞膜上形成可激活NF-κB的信號復合物I(TNFR1-TRADD-RIP1-TRAF2),促進靶基因轉錄,抵抗凋亡,促進生存(圖3[4, 17]

此外,TNFR1通過網格蛋白(clathrin)發生內化(internalization),內化后的TNFR1通過TRADD的DD和FAS相關結構死亡蛋白結構域蛋白(FADD)的DD結合,FADD可通過其死亡效應DED結構域與caspase-8的DED結合,在胞漿內形成信號復合物II,即DISC(death-inducing signalling complex,死亡誘導信號復合體),激活caspase-8,導致細胞凋亡或程序化壞死(necroptosis)(圖3[4, 17]

TNFR1-sTNF-α信號通路

圖3. TNFR1-sTNF-α信號通路

*本圖來源于Cytokine 出版物[17]

3.2 TNFR1-tmTNF-α信號通路

關于TNFR1-tmTNF-α的信號通路目前的研究機制尚不明確,有研究發現,TNFR1-tmTNF-α信號通路不同于TNFR1-sTNF-α,后者可介導生存或凋亡兩種截然不同的信號途徑。而TNFR1-tmTNF-α僅能介導細胞的凋亡,并不能激活NF-κB。雖然TNFR1與兩型TNF結合都能引起凋亡,但兩者的信號轉導機制不同,細胞定位和影響因素也不同 [4]


4. TNFR1在腫瘤疾病中的作用

近年來,越來越多的研究者發現,TNFR1廣泛參與各種疾病的病理生理過程,尤其是在腫瘤中,其調控作用引起人們的重視。大量的數據表明,TNFR1在不同癌細胞中可以決定細胞不同的命運。雖然TNFR1包含死亡結構域,但通過不同的信號傳導通路,TNFR1也可發揮促炎和致癌作用。所以TNFR1在癌癥中,不總是發揮其應有的促凋亡生物學效應。

在惡性星形膠質瘤中,TNFR1和TNF結合,激活NF-κB通路,抑制腫瘤細胞的凋亡,研究提示TNFR1可能參與低度惡性星形細胞瘤的形成和惡性星形細胞瘤的發展 [18]。另有研究發現,在胃癌細胞中,TNFR1的表達水平與胃癌細胞的分化程度有關 [19];在大腸癌中,高表達TNFR1的病人存活率較高 [20]。最近一項研究發現,在腎透明細胞癌中,TNFR1表達,促進腫瘤樣變,誘導耐藥 [21]。而在一項小鼠模型實驗中,研究人員評估了TNFR1在肝癌中的作用,數據顯示TNFR1的缺失能顯著降低小鼠腫瘤發生率,說明TNFR1介導的信號通路促進肝癌發生 [22]

TNFR1參與到一個極其復雜的生物學過程,其對疾病的作用往往受到很多不可控因素(比如,患者個體化差異)的影響。目前對于TNFR1在人類全身各系統腫瘤中的表達研究還不是很深入,在造血系統、神經系統、泌尿生殖系統、消化系統以及頭頸部的惡性腫瘤中,TNFR1均表達增強,其究竟是介導細胞增殖還是凋亡,需要更多的研究進一步闡明。因此,TNFR1抗體或者抗TNFR1抗體在腫瘤治療中的意義重大。


5. TNFR1在COVID-19治療中的潛在價值

自從新型冠狀病毒(COVID-19)大流行開始以來,新型冠狀病毒(COVID-19)已在地球上幾乎每個國家被發現,全球超過200萬人死亡。值得注意的是,在COVID-19患者中,研究者們發現了高水平的炎癥和促炎性細胞因子,其中包括TNF,前面提到,TNF的功能主要通過TNFR1介導,所以單獨阻斷TNFR1來保持免疫系統功能,成為研究者們最為理想的途徑。盡管目前市場上尚無抑制TNFR1的抗體藥物,但令人興奮的是,一項由葛蘭素史克(GSK)公司研發的抗TNFR1藥物(GSK-2862277)已進入臨床二期,用于急性肺損傷。

事實上,制藥工業界和學術界為治療COVID-19正在做前所未有的努力中,強生、賽諾菲、輝瑞、默克等全球性公司正在開發近200種治療藥物,世界各國政府正投入巨額資金用于藥物的研發。不斷出現的市場需求,加上有機會解決人類最近記憶中最大的醫學挑戰之一-COVID-19,這讓全球的醫藥企業都斗志激昂。盡管要真正了解COVID-19,還有很長的路要走,但是我們知道炎癥是其中的重要組成部分,因此TNFR1抑制劑有望成為治療冠狀病毒患者的候選藥物。


TNFR1蛋白

Recombinant Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A(TNFRSF1A),partial (Active) (Code: CSB-MP023977HU1)

High Purity Validated by SDS-PAGE
CSB-MP023977HU1 SDS-PAGE

(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA
High Purity Validated of CSB-MP023977HU1

Immobilized TNF-α (CSB-YP023955HU) at 5 μg/ml can bind human TNFR1, the EC50 is 7.799-10.90 ng/ml.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA
High Purity Validated of CSB-MP023977HU1

Immobilized LTA (CSB-MP013218HU) at 5 μg/ml can bind human TNFR1, the EC50 is 4.409-6.797 ng/ml.


參考文獻:

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